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使用膠原酶的時候要注意些什么？
2017-04-17 膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構，而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質，因此，這對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。膠原酶（collagenase）是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬，內含較多結締組織或膠原成分時，用胰蛋白酶解離細胞的效果較差，這時可采用膠...
來說一說蛋白酶K都有哪些功能？
2017-03-30 蛋白酶K，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質的能力，因而它應用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(pH4-12.5)均有活性。推薦反應緩沖液：50mMTris-HCl(pH7.5),10mMCaCl2。蛋白酶K配制標...
如何測定高保真DNA聚合酶的保真度？
2017-03-27 在PCR實驗中使用適當?shù)木酆厦笇⒋_保*的產量和特異性，但市場上有那么多種聚合酶，如何選擇，有時還真是個難題。廠家一般都會提供一個選擇指南，列出每個產品的特異性、保真度、產量等。保真度是實驗成功zui關鍵的因素之一，不可不重視。什么是聚合酶保真度？DNA聚合酶的保真度是指準確復制目的模板的結果。具體來說，這涉及到多個步驟，包括讀取模板鏈，選擇正確的三磷酸核苷，并將此核苷酸插入3’引物末端的能力。為了區(qū)分正確和錯誤的核苷酸，一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。這種“校正...

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