在分子生物學(xué)、臨床診斷及高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)中,外源性核酸污染是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素。為有效消除環(huán)境中殘留的DNA或RNA,保障實(shí)驗(yàn)的潔凈度和可重復(fù)性,核酸清除劑已成為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的清潔工具。本文旨在系統(tǒng)介紹其正確使用方法及關(guān)鍵注意事項(xiàng),幫助科研人員安全、高效地開展相關(guān)工作。
一、基本原理
通常含有能夠高效降解DNA和RNA的酶類(如DNase、RNase)或化學(xué)成分(如次氯酸鈉、季銨鹽類化合物),通過(guò)破壞核酸的磷酸二酯鍵,使其斷裂成小片段,從而失去擴(kuò)增或檢測(cè)活性。部分產(chǎn)品還具備廣譜抗菌、抗病毒功能,適用于多種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。
二、適用范圍
1.PCR實(shí)驗(yàn)室操作臺(tái)面、移液器、離心機(jī)等設(shè)備表面;
2.樣本處理區(qū)、試劑配制區(qū)及產(chǎn)物分析區(qū)的環(huán)境消毒;
3.實(shí)驗(yàn)服、手套、防護(hù)面罩等個(gè)人防護(hù)用品的去污染處理;
4.超凈工作臺(tái)、生物安全柜內(nèi)部清潔;
5.高通量測(cè)序平臺(tái)及自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)的維護(hù)。
三、使用步驟
1.準(zhǔn)備工作:使用前請(qǐng)佩戴手套、口罩及護(hù)目鏡,確保通風(fēng)良好。檢查產(chǎn)品有效期及包裝完整性,避免使用過(guò)期或變質(zhì)試劑。
2.表面預(yù)清潔:若待處理表面有明顯污漬或有機(jī)殘留物,應(yīng)先用清水或70%乙醇擦拭干凈,再施用核酸清除劑,以提高去污效率。
3.噴灑或擦拭:將核酸清除劑均勻噴灑于目標(biāo)區(qū)域,或用無(wú)紡布蘸取適量試劑進(jìn)行擦拭。確保覆蓋所有可能接觸樣本的區(qū)域,包括儀器縫隙、按鈕、門把手等死角。 4.作用時(shí)間:多數(shù)需作用5–10分鐘才能充分降解核酸。具體時(shí)間請(qǐng)參照產(chǎn)品說(shuō)明書,切勿提前擦拭或沖洗。
5.后續(xù)處理:作用完成后,可用無(wú)菌水或70%乙醇再次擦拭表面,去除殘留試劑,防止對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成干擾。對(duì)于精密儀器,建議使用配套的中和劑或?qū)S们鍧嵅肌?/span>
6.廢棄物處置:使用過(guò)的擦拭材料應(yīng)按生物危害廢棄物規(guī)范處理,不可隨意丟棄。
四、注意事項(xiàng)
1.避免與強(qiáng)還原劑或強(qiáng)酸強(qiáng)堿混用:某些核酸清除劑成分不穩(wěn)定,與不相容化學(xué)品混合可能產(chǎn)生有毒氣體或降低去污效果。
2.不可用于人體或活體組織:僅限物體表面使用,嚴(yán)禁接觸皮膚、眼睛或黏膜。若不慎接觸,應(yīng)立即用大量清水沖洗并就醫(yī)。
3.注意材質(zhì)兼容性:部分含氯或強(qiáng)氧化性清除劑可能腐蝕金屬、橡膠或塑料部件。使用前建議在不顯眼處小范圍測(cè)試,確認(rèn)無(wú)損傷后再全面應(yīng)用。
4.定期更換與輪換使用:長(zhǎng)期單一使用某類清除劑可能導(dǎo)致微生物耐受性增強(qiáng)。建議結(jié)合物理清潔(如紫外線照射)與其他消毒方式交替使用,提升整體防控效果。
5.儲(chǔ)存條件:多數(shù)需避光、陰涼處保存(通常2–25℃),避免高溫或冷凍。開封后應(yīng)密封保存,并在規(guī)定期限內(nèi)用完。
6.驗(yàn)證清除效果:對(duì)于關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)區(qū)域(如qPCR實(shí)驗(yàn)室),建議定期采用陰性對(duì)照或熒光定量法評(píng)估核酸清除效果,確保無(wú)交叉污染風(fēng)險(xiǎn)。
五、結(jié)語(yǔ)
核酸清除劑作為實(shí)驗(yàn)室污染防控體系中的重要一環(huán),其正確使用直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性與科研成果的可信度??蒲腥藛T應(yīng)充分理解產(chǎn)品特性,嚴(yán)格遵循操作規(guī)程,同時(shí)結(jié)合良好的實(shí)驗(yàn)室管理習(xí)慣,共同構(gòu)建潔凈、安全的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。唯有如此,方能在日益精密的生命科學(xué)研究中行穩(wěn)致遠(yuǎn)。